大阪大学 蛋白質研究所 高磁場NMR分光学研究室

ResearchTheme 1

SAIL-NMR法を活用した高分子量蛋白質の溶液構造解析法の開発

溶液NMR法では、分子量20 kDa以上の生体高分子の構造解析は、NMR信号の感度低下や縮重が顕著となるため、困難とされています。 我々は、この“分子量の壁”を打ち破るべく、独自に確立した安定同位体標識技術を利用した新しいNMR測定法を開発しています。 現在では、100 kDa程度の蛋白質についても、高感度にNMR信号を捉えることに成功しています。今後は、さらなる改良を進め、 1000 kDa以上の蛋白質複合体の構造動態解析や細胞内の夾雑環境下における高感度NMR測定法の開発を目指します。

Structural studies of larger proteins using new SAIL amino acids

In conventional NMR analysis, the structural studies of large molecular weight proteins (> 20 kDa) has been considered challenging due to the significant reduction in NMR signal sensitivity and line broadening. To overcome this problems, we have developed a novel NMR method using our original stable isotope labeling technique. Currently, we have successfully captured NMR signals with high sensitivity for > 100 kDa proteins and protein complexes. We aim to further optimization this technique and focus on the structural dynamics analysis of supra molecular protein complexes (> 1000 KDa) and the development of high-sensitivity NMR measurements under intracellular environments.

References
Kainosho et al., J. Biomol. NMR (2018); Gauto et al., J. Am. Chem. Soc. (2019); Miyanoiri et al., BBA Gen. Subj. (2019)